凯氏定氮仪测定面膜原液的蛋白含量
重组胶原蛋白敷料贴,该产品含重组人源化胶原蛋白。用于提供皮肤过敏、激光、光子术后等浅表或非慢性创面的愈合环境。
面膜原液
SKD-1000全自动凯氏定氮仪,SKD-20S2红外石英消化炉,分析天平等
硫酸(分析纯),20g/L 硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,400g/L 氢氧化钠溶液,硫酸铜硫酸钾混合催化剂,0.02mol/L盐酸标准滴定液。
取5g(精确至0.1mg)左右的样品,加硫酸铜硫酸钾混合催化剂5g,再加浓硫酸10ml。
空白放相同的催化剂和浓硫酸。
将加完样品和试剂的消化管放置于消化炉上,盖好排废装置,设定红外石英消化炉参数如表 1 所示
表1 消化炉参数设置
程序段 | 温度℃ | 时间min |
程序段1 | 180 | 5 |
程序段2 | 250 | 5 |
程序段3 | 350 | 10 |
程序段4 | 410 | 90 |
消解完成后,待消化管冷却至室温后取下备用。检查定氮仪各试剂是否充足,同时做仪器空白,待仪器空白稳定后,可将消解好的样品上机测试。定氮仪参数设置如表 2 所示:
表2 定氮仪参数设置
稀释液 | 碱 | 蒸馏时间 | 蒸馏功率 | 蛋白系数 | 标准酸 | 标准酸浓度 | 样品重量 |
40ml | 45ml | 6分钟 | 100% | 6.25 | 盐酸 | 0.02026mol/L | g |
实验选取的蛋黄软磷脂样品经消解、蒸馏、滴定,得到实验结果如表 3 所示:
表3 实验结果
样品名称 | 测量次数 | 重量g | 测量值% | 平均值% | 测量重复性RSD(≤0.5%) | 标准值% |
面膜原液样品1 | 1 | 5.62380 | 0.13971 | 0.139315 | 0.28% | / |
2 | 5.59840 | 0.13892 |
本次测试的面膜原液样品1蛋白含量为0.139315%,RSD值为0.28%,测试结果低于凯氏定氮仪国标要求RSD≤0.5%。
[1] 《中国药典》(2020 版):通则 0704.
[2] GBT 33862-2017 全(半)自动凯氏定氮仪[S].